Пуповинна кров: для чого потрібна, вартість і зберігання

Радикальним методом лікування багатьох важких гематологічних хвороб є трансплантація стовбурових клітин, які виділяють з тканини кісткового мозку або крові. Здійснити його можливо шляхом пошуку підходящого донора, що досить не просто. Ймовірність існування нерідного донора, сумісного з HLA-антигенною складу, складає 1:100000. Для цього необхідні цілі регістри типированных донорів, обчислюються кількома сотнями тисяч чоловік. Частково вирішити цю проблему допомагає заготівля пуповинної крові.

Клінічне використанняВ пуповинній крові міститься велика кількість стовбурових клітин, які можуть бути використані в майбутньому для лікування ряду серйозних захворювань.

Кров, отримана з плаценти, є багатим джерелом гемопоетичних клітин. Концентрація колонієутворюючих одиниць в ній значно перевищує їх кількість в крові дорослої людини навіть після стимуляції факторами зростання. Вона наближається за своїм складом до костномозговой тканини. Тому стовбурові клітини, які містяться в пуповинній крові, можуть успішно застосовуватися в гематології для лікування наступних захворювань:

• гострі лейкози;
• апластичні анемії;
• миелодиспластические синдроми;
• неходжкінські лімфоми;
• макроглобулінемія Вальденстрема;
• деякі вроджені захворювання (анемія Фанконі, спадкові гемоглобінопатії, синдром Барра та ін).

Трансплантація гемопоетичних клітин, отриманих з плацентарної крові, є перспективним напрямком в медицині, яка вже застосовується в неврології (наслідки травм, дегенеративні захворювання нервової системи), ревматології (дифузні хвороби сполучної тканини), онкології і інших галузях.

Ефективність такого лікування визначається:

• своєчасністю діагностики та лікування захворювання;
• ступенем гістосумісності (по системі HLA) донора і реципієнта;
• віком хворого (дає хороші результати у дітей молодше 5 років);
• кількістю пересаджених стовбурових клітин (якщо їх мало, то підвищується ризик рецидиву патологічного процесу або неспроможності трансплантата).

Заготівля

Пуповинну кров отримують під час пологів через природні родові шляхи або шляхом кесаревого розтину. На етапі планування процедури вагітну жінку всебічно обстежують і виключають у неї захворювання інфекційної природи (вірусні гепатити, ВІЛ, сифіліс і ін).

Готуючись до пологів, в асептичних умовах готують систему для забору крові. Вона складається зі спеціального контейнера з гемоконсервантом і пристроєм для взяття крові.

При нормальних пологах через природні родові шляхи забір крові може здійснюватися в двох варіантах:

• Якщо плацента знаходиться в порожнині матки і ще не відокремилася, то эксфузия крові виконується після накладання затискача на пупковий канатик і відділення новонародженого від плодового місця. Для цього пуповину ретельно обробляють розчинами антисептиків, після чого виробляють пункцію пупкової вени, розташовуючи ємність для збору матеріалу на 50-70 см нижче живота породіллі, щоб кров стікала в неї мимоволі.
• Якщо плацента вже виділена з порожнини матки, то її розташовують на спеціальній рамці плодової частиною донизу, потім обробляють і пунктирують вену пупкового канатика, після чого отримують кров в контейнер.

З артерії пупкового канатика додатково береться 10 мл крові для первинного етапу обстеження на приналежність до групи крові і приховані інфекції.

Після закінчення процедури контейнер від’єднують і транспортують в банк пуповинної крові в спеціальному холодильнику або додатковому контейнері, захищеному від перепаду температур. При цьому тривалість зберігання крові з гемоконсервантом до її фракціонування не повинна перевищувати 24 годин. Інакше стовбурові клітини гинуть.

Зберігання стовбурових клітинВ ємності з рідким азотом стовбурові клітини зберігаються до 25 років.

Виділення гемопоетичних клітин з пуповинної крові проводиться в асептичних умовах.

• Для цього кров піддається центрифугированию на високих обертах, в результаті чого від неї відділяється плазма.
• Після цього приступають до осадження еритроцитів шляхом додавання седиментирующего речовини (желатин, гідроксиетилкрохмаль).
• Отриману клітинну суспензію змішують з фізіологічним розчином і двічі центрифугують.
• Потім за допомогою шприца відокремлюють клітинний осад і підготовляють його до заморожування і тривалого зберігання.

Отримані з пуповинної крові стовбурові клітини зберігаються при низьких температурах в замороженому стані:

• у холодильних камерах з температурою -80 градусів (до 6 місяців);
• у парах рідкого азоту при температурі -150 градусів (кілька років);
• у ємностях з рідким азотом і температурою -196 градусів (понад 20 років).

Для заморожування клітинної суспензії її попередньо охолоджують до +4 градусів на крижаній бані або в умовах холодильника. Потім шприцом набирають цю суспензію і переносять її в мішок для консервування, додаючи по краплях огороджує розчин, після чого мішок запаюється і поміщається в спеціальний апарат для програмного заморожування. При цьому сам процес здійснюється за чотирьохступеневою програмі, що дозволяє зберегти життєздатність клітин протягом тривалого часу.

Для використання заморожених зразків стовбурових клітин безпосередньо перед трансфузией проводиться повільне розморожування клітинної суспензії на водяній бані з температурою +40 градусів. Після ретельного перемішування виконується дослідження на збереження клітин та їх життєздатність.

Лабораторне тестування

Застосування в клінічній практиці крові, отриманої з пуповини, вимагає спеціального тестування в умовах лабораторії. Це дозволяє визначити належність за HLA-системою, оцінити якість препарату і виявити потенційну можливість зараження інфекційними захворюваннями.

Перелік необхідних лабораторних аналізів включає:

• визначення обсягу пуповинної крові і вмісту в ньому клітинних елементів (стовбурових клітин, лейкоцитів, еритроцитів);
• аналіз крові на маркери вірусних гепатитів;
• біохімічне дослідження крові (печінкові проби);
• виявлення антитіл до ВІЛ, блідою трепонеме, токсоплазми, цитомегаловірусу;
• посів крові на стерильність;
• визначення HLA-генотипу, групи крові по системі АВ0 та резус-фактору.

Для проведення всіх досліджень у повному обсязі необхідно близько 10 мл крові. З них 4 мл відразу беруть для тестування, а решта 6 мл центрифугують і заморожують, після чого знову досліджують. Це дає можливість оцінити якість трансплантата і прогнозувати час приживлення кровотворних клітин в організмі хворого.

Пуповинну кров для досліджень використовують дуже ощадливо з метою мінімізації втрат гемопоетичних клітин.

• Визначення групової приналежності, HLA-фенотипу, біохімічних показників провадиться в порції крові, взятої з артерії пуповини.
• Бактеріологічне дослідження здійснюється залишилася після центрифугування еритроцитарної маси.
• Серологічні дослідження сироватки крові з метою виявлення інфекцій проводять з використанням плазми, отриманої в процесі фракціонування.
• Оцінка концентрації клітин-попередників гемопоезу проводиться в клітинному осаді, отриманому шляхом розділення крові на фракції.

Переваги і недоліки використання пуповинної крові

В даний час багато батьків замислюються про те, чи варто зберігати пуповинну кров дитини, важливо це чи ні? Для того щоб відповісти на ці питання, розглянемо переваги цього методу лікування.

• Процедура є абсолютно безпечною (не завдає шкоди здоров’ю матері і дитини).
• Не вимагає додаткового знеболення.
• Має низький ризик зараження інфекційними захворюваннями.
• Надає можливість тривалого зберігання гемопоетичних клітин.
• Забезпечує біологічне страхування життя дитини при розвитку у нього важких захворювань (особливо кровотворної системи).

Однак існують і недоліки застосування пуповинної крові як джерела стовбурових клітин.

• Основним з них є відносно невеликий обсяг одержуваного матеріалу і втрати його при заготівлі і лабораторному тестуванні.
• Ще одним недоліком цієї процедури є її висока вартість при невеликій ймовірності застосування у дитини. Однак вона малосопоставима з вартістю пересадки кісткового мозку, яка обчислюється десятками тисяч доларів.

В даний час в Росії і інших країнах існують спеціальні банки пуповинної крові. Це можуть бути приватні та державні структури. Останні переслідують мету створити певний запас біологічного матеріалу, який може використовуватися для наукових досліджень і лікування хворих.

Приватні банки займаються зберіганням іменних зразків, якими можна скористатися в разі хвороби. Вони пропонують своїм клієнтам різні тарифи:

• Середня вартість забору та зберігання пуповинної крові в Гемабанке становить 65000 рублів, окремо оплачується кожен рік зберігання (7000 рублів).
• У банку стовбурових клітин «Криоцентр» пакет зберігання стовбурових клітин (25 років) має загальну вартість близько 230 000 рублів.

Висновок

Заготівля пуповинної крові як джерела стовбурових клітин важлива не тільки для планованої або можливої спорідненої трансплантації. Це допомагає у вирішенні проблеми пошуку гистосовместимого трансплантата для дітей, які страждають фатальною патологією органів кровотворення та інших систем організму.

Про пуповинної крові розповідає лікар Віолетта Фролова:

Пуповинна кров. Забір пуповинної крові. Банк пуповинної крові. Зберігання пуповинної крові