Просте і високоточне визначення групи крові цоликлонами

Коли проводяться підготовчі процедури хворому перед оперативним втручанням або потрібне переливання крові, групу якої необхідно визначити гранично точно, використовують цоликлоны. Визначення групи крові цоликлонами все частіше витісняє інші методи завдяки простому алгоритму і точності результату. Процедура може проходити на будь-якому етапі лікування хворого.

Цоликлон – що це?

Щоб визначити групу крові і резус-фактор у хворого в лабораторіях застосовують кілька методик, але використання цоликлонов є найбільш частим. Це моноклональні антитіла, які прискорюють процес реакції аглютинації завдяки своїй підвищеній активності. Аглютинація – склеювання еритроцитів з подальшим випаданням в осад.

Цоликлоны – досить точний інструмент у вигляді рідини. Принцип дії заснований на тому, що містяться в реагенте речовини, вступаючи в реакцію з агглютиногеном, здатні викликати згортання крові. Таким чином, цоликлон – показник наявності в крові агглютиногена А (реагент Анти-А) та В (реагент Анти-В). Існує ще одна безбарвна рідина Анти-АВ, яка складається з суміші двох попередніх і необхідна для підтвердження попереднього результату.

Дослідження цоликлонами проводять в лабораторних умовах, такий спосіб визначення групи крові вважається самим простим, швидким і досить вірним.

Як працювати з цоликлонами

Для проведення досліджень необхідно в лабораторії створити відповідні умови. Насамперед – хороше освітлення. Температура повітря повинна бути в межах від +15 градусів Цельсія до +25. Якщо в силу погодних умов встановити такий режим неможливо, аналіз слід проводити на попередньо охолодженому планшеті. Реагенти зберігаються в холодильнику, щільно закритих флаконах. В іншому випадку існує вірогідність висихання антитіл, що призведе до зниження їх активності і неможливості отримати правильний результат. Крім того, препарати не повинні бути каламутними і містити пластівці. Для роботи з кожним треба користуватися окремою піпеткою.

Для проведення процедури знадобиться планшет, за відсутності такого підійде біла тарілка або плоска пластина. Важливо не переплутати цоликлон Анти-А, який жовтувато-рожевого кольору, і синій Анти-Ст. Спочатку рідини абсолютно різні за кольором, але після з’єднання з кров’ю ця різниця дещо втрачається. Саме тому рекомендується позначити на планшеті де який реагент знаходиться. Потім на планшет необхідно капнути один і другий цоликлон, кожен на своєму місці, позначеному написом. Краплі повинні бути приблизно по 0,1 мл Поруч з антитілами капнути по невеликій краплі крові, після чого змішати її з реагентом. Це краще зробити скляною паличкою, яку змінити або ретельно вимити перед маніпуляцією з другою парою крові і рідини.

Важливий момент. Кількість крові по відношенню до цоликлону повинно бути в співвідношенні 1:10. Коли еритроцити перевищують цю межу, реакцію аглютинації можна не помітити, якщо ж крапля занадто маленька – процес протікає дуже повільно. Що стосується крові, вона може бути будь-яка, з пальця або з вени, в консерванті і без нього.

І ще одне застереження. Досліджувані рідини двох різних реагентів не повинні злитися між собою. Якщо це сталося, дослідження доведеться відновити.

«Читання» результату

Спостереження за реакцією, для якого не потрібно додаткового обладнання, триває приблизно три хвилини, після чого можна дати оцінку результату. Планшет у цей час треба легенько похитувати, цей фактор важливий для достовірності результату.

При позитивному результаті відбувається склеювання еритроцитів (аглютинація), де агглютинаты проявляються у вигляді найдрібніших частинок, які переростають в пластівці великих розмірів. У разі негативної реакції агглютинаты у краплі, яка забарвлюється червоним кольором, відсутні (склеювання не відбувається).

• Реакція аглютинації (склеювання) не відбулася ні в одному зразку. Це означає, що в еритроцитах немає досліджуваного агглютиногена. Отже, кров I групи (Про).
• Якщо в ході аналізу помітна згортання крові в результаті реакції з цоликлоном Анти-А, еритроцити містять антиген А. Кров відноситься до II групи.
• Аглютинація спостерігається з реагентом Анти-В, це показує, що досліджуваний зразок має ІІІ групу.
• Якщо показник склеювання відзначений при взаємодії з усіма цоликлонами, у людини IV група. В даному випадку проводять контрольний аналіз, для чого натрій хлорид змішують з досліджуваною кров’ю. Відсутність аглютинації підтверджує четверту групу.

Вкрай важливо точно встановити групу крові, це дозволить виключити важкі ускладнення, які в гіршому випадку можуть призвести до смерті реципієнта. Картина, яка спостерігається на планшеті, ідентична процесу в організмі хворого. Тому результати, отримані за допомогою цоликлонов, безпосередньо під час забору крові (в екстрених випадках), повинні бути підтверджені лабораторними дослідженнями.

Реагенти для визначення резус-фактора

Аналіз з використанням цоликлонов для визначення РФ проводиться в наступній послідовності. На планшет нанести реагент (0,1 мл), поруч капнути кров (0,01 мл). Цоликлон і біологічний матеріал змішати скляною паличкою, під час очікування реакції планшет треба похитувати. Вже через кілька секунд відзначається прояв аглютинації, однак для достовірності необхідно почекати приблизно три хвилини.

Так само, як і в дослідженнях на ГК, в спеціальному лабораторному обладнанні немає необхідності. Якщо спостерігається склеювання еритроцитів і випадання осаду, кров прийнято вважати резус-позитивною. Коли аглютинація відсутня – резус негативний.

Дослідження з використанням цоликлонов дають достатньо точну інформацію при правильному дотриманні ходу процедури, порушення якої стане причиною невірного результату аналізу.