Принципи використання ПЛР діагностики ВІЛ

Методами ІФА і ПЛР діагностується ряд захворювань, які передаються статевим шляхом.

Діагностика ВІЛ-інфекції та аналіз крові на ВІЛ

При підготовці до обстеження пацієнтам протягом двох днів небажано вживати жирну їжу. Як і аналіз крові на віруси, проби беруться натщесерце, останній прийом їжі був не пізніше 8 годин тому. Виключити з раціону смажене і алкоголь. Дотримуючись цих нескладних вимоги, ви наближаєте результати своїх обстежень до більш точним.

У список виявлених захворювань входять:

• вірус папіломи людини (ВПЛ);
• хламідії;
• герпес (додатково призначається аналіз крові на герпес);
• уреаплазма;
• микоплазма;
• гонорея;
• цитомегаловирус;
• трихомониаз;
• токсоплазмоз.

ПЦР на ВІЛ в діагностиці на інфекції

У зв'язку з тим, що немає відомих симптомів, характерних виключно для ВІЛ-інфекції, грунтуючись лише на скаргах звернулася пацієнта, зробити розпізнавання ВІЛ-інфекції не представляється можливим.

Тестування на ВІЛ стало необхідністю, тому що сучасне думка суспільства про цю хворобу зводиться до того, що СНІД вважають смертельним вироком. Зустрічалися такі випадки, що після нерегулярних сексуальних контактів людина приділяє підвищену увагу сигналів свого організму, знаходячи, а часто вигадуючи все нові ознаки смертельної хвороби.

Проведення дослідження в лабораторних умовах на сьогоднішній момент єдиний і найнадійніший варіант діагностики (аналіз крові на ВІЛ). Використовують ПЛР для визначення наступних проблем зі здоров'ям:

• для підтвердження або спростування наявності ВІЛ в період серонегативного вікна;
• при сумнівному результаті імуноблоту (щоб встановити точний опис патологічного процесу);
• при встановленні генотипу ВІЛ-1 або ВІЛ-2;
• для встановлення і спостереження за вірусної завантаженістю організму;
• для виявлення ВІЛ-статусу у новонароджених дітей, матері яких є носіями ВІЛ;
• при переливанні крові.

Перевага методу ПЛР при діагностуванні інфекційних захворювань:

1. Націлене виявлення наявності в організмі причини хвороби. Більшість наявних на сьогоднішній день методів діагностики, наприклад, імуноферментний аналіз, показують наявність в організмі елементів, які являють собою продукти розпаду життєдіяльності інфекційних агентів, що передає інформацію про те, що в організмі присутній інфекція. У структурі ДНК відшукується характерний ділянку, який є збудником інфекції та вказує на її пряме наявність.
2. Висока характерність методу ПЛР визначена тим, що в тканинах, наданих для дослідження, виявляється унікальний, типовий тільки для цього збудника фрагмент ДНК. Характерність вказується нуклеотидним порядком праймерів.
3. Найвища сприйнятливість методу ПЛР дає потенціал для виявлення знаходяться в організмі клітин вірусів і бактерій, навіть якщо їх одиниці. Якщо іншими відомими на сьогоднішній день методами виявити збудника інфекційної хвороби не представляється можливим, то на допомогу приходить метод ПЛР-аналізу. Якщо відчутність мікроскопічних і імунологічних тестів варіюється від 103 до 105 клітин, то при ПЛР-аналізі цей показник набагато менше і поміщений в рамки від 10 до 100 клітин.
4. Стрімкість формування результату досить значна, тому що не потрібно чекати виділення і плекання самого збудника, що в інших схожих випадках займає левову частку часу. Біоматеріал обробляється протягом 4-5 годин, це дає можливість виявлення не тільки гострих, але і прихованих інфекцій. Найбільш результативним метод ПЛР-діагностики при дослідженні вірусів з найвищою антигенної мінливістю і паразитарними агентами, розташованими всередині клітин.
5. ПЛР-методи уможливлюють виявити збудника не тільки з лабораторного матеріалів, прийнятих безпосередньо від пацієнта, але і з тканин , взятих із зовнішніх об'єктів його проживання.

При встановленні в людини яка звернулася за медичною допомогою пацієнта ствердної результату на ВІЛ-інфекції починають проводити більш глибокі дослідження хворого для з'ясування і уточнення характеру захворювання і його перебігу, а також підстави і характеру вторинних хвороб, рівня ураження імунітету.

Аналізи ІФА і ПЛР: особливості дослідження, принципи і розшифровка

Кров для проведення аналізу береться з вени. У період вагітності забори крові на СНІД проводяться в неухильному порядку. Висновки про відсутність або присутності в організмі хворого вірусу імунодефіциту виробляються за результатами наявності або відсутності антитіл. ІФА потрібно проводити не відразу після підозри на зараження, а через деякий час, щоб в крові пацієнта утворилися антитіла. Проходить з різних причин від 3 тижнів до 3 місяців.

Крім того, виявлено, що результат ІФА може бути і хибнопозитивним і хибнонегативним. При дуже ранній діагностиці на передбачувану інфекцію, коли антитіла до ВІЛ ще не з'явилися, виходить помилково негативні результати. У таких випадках для уточнення потрібно перездати кров на ВІЛ після 1-3 місяців.

Хибнопозитивний підсумок, навпаки, може бути отриманий у разі, коли в людини яка звернулася пацієнта є хронічні інфекції, онкологічні хвороби, аутоімунні захворювання, крім перерахованих можливі відхилення від норми і в інших ситуаціях. Тому при позитивному результаті ІФА його неодмінно перевіряють найбільш сприйнятливими способами.

ПЛР діагностика входить до лав нинішніх найбільш високотехнологічних способів проведення досліджень, досить часто використовується при виявленні інфекційних захворювань. Діагностування ДНК увібрало в себе кілька різних способів проведення досліджень, більшою мірою популярний сьогодні метод полімеразної ланцюгової реакції, або ПЛР.

В основі цього методу лежить знаходження в тканинах для мікродослідження малої частини ДНК збудника даної інфекції. При цьому мала частина ДНК містить в собі пари ДНК кількістю до декількох сотень, які знаходяться в строгому порядку.

Метод ПЛР є найбільш точним, з його допомогою можливо визначення наявності вірусу незалежно від того, з'явилися антитіла чи ні. Але, не дивлячись на свою точність, метод має один серйозний недолік, який якраз і викликаний його підвищеною точністю. Існує досить висока ймовірність, що результат виявиться помилковим. Тому в зв'язку з цим методом і на додаток до нього застосовують інші способи для виявлення генного і антигенного матеріалів.

Сутність діагностики гепатитів за допомогою ПЛР

Існує п'ять доведених вірусів, що викликають хвороби печінки. Це відомі віруси гепатиту А, В, С, D, Е. Дуже рідкісними є випадки, коли гепатит викликається вірусом Епштейна-Барр, який на ділі є різновидом герпесу. Перераховані віруси є представниками різних родин, що відбивається на їх лікуванні в залежності від виду гепатиту.