Аналіз ПЛР що це? Це ефективний метод молекулярної біології, який застосовують в комплексі з уже традиційними імунологічними, морфологічними і біохімічними дослідженнями. Інфекційні захворювання еволюціонують і розвиваються, як і саме людство. З кожним роком їх стає все більше, а діагностувати їх все важче. Фактори, які провокують появу хвороб і впливають на їх розвиток, теж поступово пристосовуються до оточуючих зовнішніх умов, змінюючись разом з ними. Це послужило причиною того, що в медицині стали з'являтися нові методи і технології, які допомагають отримати більш точні результати в діагностиці того чи іншого захворювання.

Детальніше про аналіз ПЦР

Така методика лабораторної діагностики інфекційних захворювань ґрунтується на тому, щоб виявити збудник інфекції, яку підозрює лікар у матеріалі дослідження. Полімеразна ланцюгова реакція буде їх ідентифікувати, виявляючи відповідний генетичний матеріал (РНК або ДНК) в пробах, які взяті у пацієнта.

ПЛР була винайдена американським вченим Кері Мюлліса в 1983 році.

Більшість інфекцій, якщо виявити їх на ранніх стадіях розвитку, добре піддається лікуванню. Саме тому метод ПЛР настільки дієвий, адже він здатний виявити навіть віруси або бактерії, чиї клітини поодинокі в матеріалі. Більш того, така діагностика визначає вірус, встановлює природу його появи, силу, з якою він впливає на організм, навіть кількість мікробів в організмі пацієнта. Всю інформацію, отриману методом полімеразної ланцюгової реакції, лікар зможе застосувати для того, щоб вибрати відповідні лікарські препарати і призначити відповідне лікування.

Дослідження методом ПЛР

По самому принципу роботи все відбувається досить просто. Взятий у пацієнта біологічний матеріал поміщають в спеціальний реактор. Потім туди ж додаються такі специфічні ферменти, які зможуть зв'язатися з ДНК існуючого в матеріалі мікроба і зробити синтез її копії.

В основі копіювання лежить принцип ланцюгової реакції. Тобто на вчинення всього процесу буде потрібно кілька етапів. Спочатку 1 молекула ДНК утворює 2 нові молекули, потім з них вийде вже 4 нових, і так до сотень і тисяч копій. Після цього буде проведено аналіз та його розшифровка.

Фрагменти ДНК мікроба можуть міститися в різному біологічному матеріалі:

• в біологічних рідинах (слині, суглобової, навколоплідної, плевральної, спинномозкової рідини, соку простати);
• в крові і її сироватці, в плазмі;
• в соскобе епітеліальних клітин (зішкріб з цервікального каналу, з уретри як для жінок, так і для чоловіків);
• в сечі (на аналіз буде потрібно ранкова сеча, а саме її перша порція);
• в мокроті;
• в слизу та інших біологічних виділеннях;
• в біопатов шлунка і дванадцятипалої кишки.

Які захворювання можуть бути виявлені методом ПЛР?

Лікарі вважають цей вид діагностики одним з найбільш точних. Дане дослідження дозволяє виявити практично всі вірусні захворювання, які на сьогоднішній день відомі медицині. Дуже важливим аспектом є і те, що серед них є такі інфекції, які живуть в людському організмі довгі роки, при цьому ніяк не проявляючи себе. Вони просто ростуть в очікуванні, коли їм буде найбільш комфортно проявитися (зниження імунітету, виснаження організму та інше). Виявлення таких інфекцій прихованого типу особливо актуально в урологічних та гінекологічних областях.

Ось деякі захворювання, за якими найчастіше проводять аналіз методом полімеразної ланцюгової реакції:

• гепатити В і С;
• багато хвороб, які передаються статевим шляхом (діагностика хламідіозу, уреаплазмозу, мікоплазмозу, кандидозу статевих органів, БВ, трихомоніазу, інфекційного мононуклеозу, папіломавірусної інфекції (ВПЛ), СНІДу та ін.);
• герпесная інфекція (включаючи і статевий герпес);
• туберкульоз і хелікобактеріоз.

Метод ПЛР дає хороші результати, тому що більшість з цих захворювань характерно тим, що їх симптоми (особливо на ранній стадії) не особливо помітні. Зате наслідки, які вони надають на організм, дуже негативні і найчастіше досить небезпечні для здоров'я і навіть життя.

Наприклад, хвороби, що передаються статевим шляхом, можуть у жінок істотно збільшити можливість виникнення раку шийки матки, негативно вплинути на перебіг вагітності або стати причиною безпліддя. До того ж саме від здоров'я матері залежить і здоров'я її майбутнього малюка. Тому дуже важливо при найменших підозрах на приховані інфекції вчасно здати кров на діагностику, щоб не допустити зараження плода через проникнення збудників хвороби. Для чоловіків наслідки не менш негативні: зниження рухливості і життєздатності сперматозоїдів, розвиток чоловічого безпліддя і простатиту, ураження сечівника та інше.

Такий аналіз дуже актуальне і для своєчасного виявлення вірусного гепатиту, туберкульозу, різних кишкових інфекцій. Коли потрібне негайне лікування, дуже важливо розуміти, який саме збудник вразив організм і з чим доведеться боротися. Кров або будь-який інший біологічний матеріал пацієнта допоможе провести повну і правильну діагностику і призначити лікування, яке допоможе швидкому відновленню функцій організму і буде сприяти одужанню.

Герпес теж надзвичайно стійкий і небезпечний. З неактивного режиму він легко може перейти в прогресуючий, вражаючи центральну нервову систему, впливаючи на виникнення і розвиток таких страшних хвороб, як менінгіт і енцефаліт.

Розшифровка аналізу

Після проведення дослідження ви можете отримати або позитивний, або негативний результат. Саме позитивні результати будуть вказувати на те, що та чи інша інфекція присутня в вашому організмі. Негативний результат розшифровується так, що в організмі пацієнта передбачувана інфекція відсутня. Тобто в біологічному матеріалі, який був зданий на дослідження, нічого не виявили.

Будь-які показники повинен розшифрувати та озвучити вам лікар. Чи не турбуйтеся і не лякайтеся поганих результатів, адже реакція виявила захворювання, а це означає, що після додаткових обстежень доктор зможе призначити повноцінне лікування. Головне не займатися самолікуванням і не затягувати процес.

Підготовка до аналізу: що потрібно знати?

Для виявлення різних захворювань будуть потрібні різні біологічні матеріали. До того як зробити ПЛР, обов'язково проконсультуйтеся з відповідним фахівцем і ретельно підготуйтеся до майбутньої процедури.

Для цього знадобиться строго виконувати всі рекомендації і вказівки вашого доктора. Не забудьте, що кров, як правило, беруть натщесерце. Для здачі мазка з піхви або уретри потрібно 1-2 діб утриматися від статевих контактів, всю необхідну гігієну статевих органів проводити з вечора, а вранці тільки обполоснути теплою водою. Також важливо припинити приблизно за тиждень прийом лікарських препаратів, якщо вони не обумовлені з лікарем. І протягом 2-3 годин до того, як здати аналіз, що не мочитися. Для жінок варто врахувати те, що оптимальний час для проведення дослідження це кілька днів перед або відразу після менструації.

Метод ПЛР: основні переваги та недоліки

у даного виду діагностики дуже багато переваг.

по-перше, будь-які збудники інфекційних захворювань визначаються за прямим на них вказівкою, на відміну від інших традиційних лабораторних досліджень.

По-друге, цей аналіз просто універсальний, адже для його проведення доступні майже будь-які біологічні матеріали, які часто не сприймає будь-який інший метод дослідження.

Дуже важливим є той момент, що коли проводиться ця діагностика, то в досліджуваному матеріалі відбувається виділення фрагмента ДНК, який буде притаманний тільки якогось конкретного збудника, тобто суто певного вірусу або бактерії. Це говорить про те, наскільки специфічною є дана реакція.

Ще одним аргументом на користь цієї діагностики буде висока швидкість її виконання. Якщо для будь-яких культуральних досліджень будуть потрібні не дні, а навіть тижні, необхідні для виділення і вирощування збудника на культурі клітин, то даний метод дозволить отримати результати протягом 4-5 годин.

ПЛР дає можливість виявити не тільки ту інфекцію, яка вже знаходиться на піку захворювання, але також і хронічні хвороби, будь-які поодинокі віруси або бактерії. Така діагностика можлива через дуже високої чутливості методу. Сюди слід віднести і той факт, що інфекція буде виявлена ​​навіть у тому випадку, якщо в біологічному матеріалі, який був зданий на аналіз, буде присутній лише одна клітина того чи іншого вірусу або бактерії.

Реакція на помилково негативні результати зустрічається дуже рідко.

Правда, метод має і свої недоліки. Одним з них є можливість отримання ложноположительного результату. Це часто відбувається через те, що інфекція вже вбита, але її клітини епітелію ще не оновилися, тому її мертві залишки реакція все одно побачить і буде клонувати. Тому варто або дочекатися повного виведення з організму мертвих клітин інфекції (від місяця до двох після проведеного лікування), або на ранньому терміні використовувати інші методи: посів або культуральний. Пізніше можна буде провести контроль і за допомогою ПЛР.

Ще однією слабкістю аналізу вважається мінливість всіх мікроорганізмів. Це означає, що якісь генотипи збудників, які вже мутували в організмі, будуть невловимі для тест-системи і ніяка реакція не відбудеться. Для цього проводяться різні розробки, щоб удосконалити цей метод.