Культивування ембріонів до стадії бластоцисти
Культивування ембріонів до стадії бластоцисти забезпечує їх приживлюваність в організмі і благополучну вагітність. Такий метод часто використовується, якщо було кілька невдалих спроб штучного запліднення раніше або якщо є серйозні медичні показання.
Культивування ембріонів до стану бластоцисти
Культивування ембріонів в лабораторних умовах до стадії бластоцисти рекомендується жінкам до 36 років, так як у них досить хороший оваріальний резерв, а також тим, у кого багато фолікулів в одному циклі.
Раніше перенесення зародків виконувався на 2-й або 3-й день після інсемінації. Тепер доктора воліють чекати більш пізнього етапу розвитку. Культивування отриманих ембріонів до стадії здорової бластоцисти дозволяє відібрати для підсадки зародки з найкращими кількісними і якісними показниками. На цій стадії поділу вже налічується 6-8 клітин.
Культивування ембріонів лікарями до стадії бластоцисти дає 35% відповідного біоматеріалу від початкового об’єму. Статистика усереднена, і тому результат може бути як краще, так і гірше в складних клінічних випадках. При достатній кількості частину з них можна зберегти на майбутнє (при плануванні другої дитини). Це послуга називається кріоконсервації і підходить для використання біоматеріалу через невизначений період часу.
Культивування ембріонів до стадії бластоцисти і перевірочні дослідження
Перед імплантацією ембріолог перевіряє клітинну життєздатність за морфологічними критеріями. Для кожного етапу розвитку (і також дня) різні критерії оцінки. Відбираються тільки найперспективніші.
Ефективна система градації містить числові і буквені позначення і заснована на визначенні внутрішньоклітинної маси, ступеня зрілості і діагностиці трофектодерми.
Довгий час оцінку і відбір для трансплантації проводили до трьох діб росту. Але після того як з’явилася можливість продовжити процес до 4-6 діб, стало очевидним, що при ранній перевірці результати вельми ненадійні. Кожен день робить характеристики зиготи більш показовими. В цілому це покращує тактику ведення повітряних процедур і ефективність кріопротоколов.
Культивування ембріонів в лабораторії до стадії бластоцисти: умови для утримання
Запліднені яйцеклітини містяться в маркованих планшетах, чашках Петрі або Нунке, які, в свою чергу, поміщаються в інкубатори. Культуральної (живильної) середовищем, в якій містяться ооцити, забезпечується насичення амінокислотами, сироватковим протеїном, необхідними енергетичними сполуками (піровиноградна та молочна кислоти, глюкоза), фізіологічними елементами (хлор, калій, магній, кальцій, натрій і ін.). Підтримується температура в 37 ° C, вологість до 99% і частка СО2 до 5%.
Культуральний субстрат за своїм складом і температурі схожий зі станом порожнини матки і фаллопієвих труб. Він розробляється в ембріологічних лабораторіях. Ембріолог підтримує сталість живильної рідини і щодня її оновлює.
Інноваційні розробки середовищ для утримання дозволили значно підвищити ймовірність успішного зачаття при культивуванні кращих ембріонів до стадії здорової бластоцисти. Сучасними спеціалізованими центрами репродуктивної допомоги використовується продукція виробників Medi-Cult та Cook.
Успішне культивування до бластоцисти також залежить від використання спеціального мультігазовая інкубатора. Визнаними в світі виробниками вважаються фірми Sanyo і Galaxy.
Культивування кращих ембріонів: додаткові дії
Культивування отриманих ембріонів до потрібної стадії з допоміжним Хетчинг проводять для підвищення їх якості. Він допомагає при дефектах вітелліновой оболонки, екстенсивної фрагментації і клітинних зміни після розконсервації.
Процедура передбачає акуратне розсічення вітеллінового шару зиготи. Освіта маленького отвору, порушення стабільності або ослаблення оболонки підвищують шанси на благополучне імплантацію.
Існує два способи допоміжної інкубації: лазерна корекція і розчин Тироде. Перший створюється з рівнем кислотності 2,5. Застосовуючи його, діють дуже обережно, так як неправильне вплив може довести до руйнування біокомпонентів. Кислотний розчин наносять піпеткою на область поряд з вітелліновим шаром. Після появи отвори виконується аспірація, щоб кислота не проникла в перівітеллінового зону. Після 2-3 маніпуляцій проводиться промивання, а потім продовжується культивування до стадії життєздатною бластоцисти.
У деяких медичних установах перевагу віддають лазеру. Але для нього теж є ризики: мутагенну і термальне вплив.
Кріоперенос після культивування ембріонів до стадії бластоцисти
Якщо при інсемінації була велика кількість клітин хорошої якості, вони можуть бути заморожені і використані в майбутньому при невдалої першої спроби або повторному зачатті. Кріозаморозку можна виконувати відразу після або на 6-й день.
Для трансплантації після кріоконсервації матці жінки потрібна спеціальна підготовка (без стимуляції яєчників і пункцій). Додаткове стимулювання ембріонів до бластоцисти не потрібно. При нормальному циклі овуляції у пацієнтки перенесення здійснюється на 7-10 день після його початку. Якщо є проблеми, то попередньо призначається курс гормональних препаратів.
Культивування, яке виконується для ембріонів до стадії повноцінної бластоцисти з подальшою кріоконсервації, дає шанс на вагітність трохи нижче, ніж при звичайній пересадці. Однак він вселяє надію пацієнткам, які перенесли будь-які захворювання в минулому.