Культивування ембріонів при ЕКЗ: особливості процедури
Культивування ембріонів при ЕКЗ — це один з етапів штучного запліднення яйцеклітини. Спочатку лікарями починається стимуляція зростання статевих клітин і їх дозрівання. Після цього вони витягуються з організму і запліднюються в лабораторних умовах. До того як повернути назад, запліднені жіночі гамети містять в спеціальному середовищі до певної стадії розвитку. Цей процес і носить назву «культивування ембріонів».
Що собою являє культивування ембріонів при ЕКЗ?
Середовище, в яку поміщаються зародки, подібна за складом і температурі рідини в фаллопієвих трубах і самій матці. Вона створюється в лабораторії по ембріології. Медичний персонал постійно відстежує стан і ріст клітин, забезпечує статичність умов утримання.
Культивування ембріонів починається на наступний день після забору фолікулів. Лікар-ембріолог перевіряє, чи відбулося запліднення і яка якість біоматеріалу. Перші ознаки успішної інсемінації зазвичай помітні через 16-18 годин. Повторна перевірка здійснюється через добу від моменту з’єднання чоловічих і жіночих статевих клітин. Доктор виконує переглядає чашки з біоматеріалом під мікроскопом і оцінює швидкість ділення. Залежно від його кількості розраховується приблизна дата перенесення бластоцист.
Чим більше було отримано яйцеклітин, тим довше триває культивування ембріонів. Це робиться для того, щоб в результаті вибрати самі життєздатні екземпляри. Вони забезпечують високу ймовірність успішного прикріплення і подальшого розвитку.
Культивування ембріонів при ЕКЗ: зміст і контроль
Вибір генетично здорових і життєздатних зигот є основним завданням. Тому в спеціалізованих клініках часто попередньо проводять генетичну перевірку. Вона визначає хромосомний набір, ймовірність появи у майбутнього малюка спадкових або пов’язаних зі статтю патологій. Подальше культивування проводиться тільки з повністю здоровими ооцитами. Крім цього у батьків є можливість визначити статеву приналежність.
Зиготи зберігаються в лабораторних ємностях з мітками (чашечках Петрі або Нунке, планшетах і т.д.) з живильної (культуральной) середовищем, насиченою енергетичними сполуками (глюкоза, молочна і піровиноградна кислота), амінокислотами, необхідними фізіологічними речовинами (магній, калій, кальцій, натрій, хлор) і сироватковим протеїном. Ємності поміщаються в особливі інкубатори з вмістом СО2 в 5-6%, 99% вологості і температурою 37 ° C.
Культивування ембріонів при ЕКЗ триває 3-6 днів, розподіл бластомеров відбувається прискореними темпами. При цьому розмір практично не змінюється: в перший день це 0,1 мм, а в п’ятий — 0,2 мм. Щодня перевіряється стан зигот і замінюється живильний субстрат.
При нормальних функціональних і морфологічних показниках клітинний розподіл відбувається швидко, і на 3-й день залишаються 2-4 бластомера однакового розміру, без роздробленості і замутнений цитоплазми.
Передімплантаційна перевірка проводиться за допомогою біопсії, FISH-аналізу або ПЛР-діагностики.
Пролонговане культивування ембріонів при ЕКЗ
В області клінічної ембріології з’явилася нова методика — продовжене культивування ембріонів при екстракорпральном заплідненні. Вчені розробили спеціальні живильні субстрати, кожен з яких відповідає мікросередовищі окремого етапу просування і формування плоду в організмі. Через 5-6 днів запліднена яйцеклітина переходить в стадію бластоцисти і її можна імплантувати.
Коли потрібно екстракорпоральне запліднення
Процедура потрібна при таких обставинах:
- у жінки дозріває менше чотирьох ооцитів , що знижує шанси на вагітність;
- гормональні порушення у будь-якого з партнерів;
- вік пацієнтки перевищує 35 років;
- результати аналізів показали присутність антитіл до сперматозоїдів;
- недостатня кількість сперми у чоловіка або сперматозоїдів в ній;
- непрохідність фаллопієвих труб;
- ендометріоз (аномальне розростання епітеліального шару на матковихстінках);
- безпліддя неясної етіології;
- невдалі спроби зачати дитину протягом півроку;
- інші патології, що перешкоджають зачаттю або нормальному формуванню плода.
Культивування ембріонів при ЕКЗ: протипоказання
Культивування ембріонів при ЕКЗ не має протипоказань, але є ряд факторів, при дії яких не рекомендують проводити екстракорпоральне запліднення або призначають попереднє лікування. Серед них:
- фіброма;
- злоякісні новоутворення;
- пороки будови статевих органів;
- вроджене або придбане відсутність матки;
- захворювання, які при вагітності можуть завдати шкоди дитині або пацієнтці;
- загострення хронічних патологій;
- запальний процес;
- інфекційні хвороби.
Культивування ембріонів при ЕКЗ: ефективність
Однією з можливих причин невдалого ЕКО вважаються проблеми з процесом інсемінації. Чому так відбувається в окремих випадках, вчені сказати не можуть, незважаючи на широкий спектр доступних діагностичних методів. Багатьом парам лікар радить перейти до іншого методу, наприклад, ІКСІ — введення сперматозоїда в цитоплазму ооцита.
Навіть при хорошій якості всіх елементів біоматеріалу, тільки частина з них придатна для подальшого використання. Це пов’язано з тим, що частина з них має невідповідний генотип або проблеми з ростом. Згідно зі статистичними даними, придатними виявляються тільки близько 68%. Саме тому при ЕКЗ так важливо культивування. При кваліфікованій підтримці у пар, які страждають на безпліддя, приживається до 95% бластоцист.