ПЛР діагностика інфекцій, сучасний і високоточний метод виявлення різних інфекційних захворювань. Чим же він відрізняється від інших аналізів?

ПЛР дослідження: основні переваги

Розшифровується ця абревіатура як «полімеразна ланцюгова реакція». Її, як свідчить Вікіпедія, винайшов в 1983 році Кері Мюлліса, американський вчений. За своє відкриття він отримав Нобелівську премію.

Деякий час ПЛР використовували лише в наукових цілях, після її успішно запозичила медицина. Суть дослідження полягає в розпізнаванні збудника інфекції на рівні ДНК і РНК. Кожен збудник, проникаючи в ДНК, змінює його структуру за певним типом. Саме по виду зміненої ДНК лаборанту стає ясно, яке захворювання ховається в організмі людини. Серед інших переваг ПЛР:

1. Виявлення першопричини інфекції, яка залишила «сліди» в ДНК. При поєднанні декількох хвороб виявити то, з якого все почалося, важко. А для правильної постановки діагнозу і підбору ефективного лікування, ланцюгова реакція має колосальне значення;
2. Встановлюється на ПЛР не тільки змінена ДНК, а й конкретну ділянку трансформації. Це необхідно для виключення сумнівів з приводу помилкових інфекцій;
3. ПЛР-діагностика настільки чутлива, що виявляє навіть поодинокі бактерії і віруси. Вони можуть залишатися в крові після неправильно призначеного лікування або незапланованого переривання прийому ліків. Мінімально діагностується кількість при розшифровці ПЛР 10 клітин-збудників. Інші методики тестування не настільки дієві;
4. Патогенні мікроорганізми виявляються навіть при відсутності виражених симптомів ЗПСШ. Виявлене на ранньому етапі таке захворювання лікується не так довго, як запущені його форми;
5. Результати ПЛР хворий отримує на руки досить швидко. На діагностику інфекцій йде не більше 4-6 годин. Укупі з розшифровкою весь процес забирає не більше 1-2 днів;
6. Взяти раз ДНК-матеріалу вистачає для проведення 5-6 проб. Хворому не доведеться здавати мазки кілька разів;
7. ПЛР і дослідження інфекцій не стоїть на місці, дана сфера постійно розвивається. Винаходяться нові тест-системи підвищеної чутливості, знижується вартість проведення дослідження. Якщо раніше воно було доступне тільки жителям мегаполісів, то тепер без нього не мислять визначення хвороби лікарі стаціонарних поліклінік в регіонах.

Особливості методу ПЛР:

1. Точність (помилки мінімальні і частота їх не перевищує 0,01%);
2. Чутливість (тест «обчислює» поодинокі бактерії в крові і мазках);
3. Специфічність (ПЛР виявляє інфекції, часто зовсім не виявляють себе до важкої стадії);
4. Унікальність (аналізи результативні в ситуаціях, коли інші дослідження нічого не виявляють).

Результати аналізу ПЛР

як працює метод ланцюгова реакція, як підготуватися до аналізу?

Ланцюгова реакція в лабораторних умовах передбачає багаторазове розмноження різних ділянок ДНК і РНК з метою знаходження того самого порушеного ланки. Амплифицируют (подвоюються) кислоти за допомогою ферментних препаратів. Використовуючи ферменти, лаборант отримує достатню кількість копій патогенного ділянки ДНК для порівняння ПЛР його зі зразками тих чи інших хвороб, спровокованих інфекцією.

Як правило, використовуються біологічні матеріали, взяті шляхом забору або мазка. Для ідентифікації (розшифровка венеричних інфекцій) на ПЛР береться мазок з піхви, шийки матки або сечівника. Іноді використовується також сеча.

Щоб підтвердити або спростувати наявність гепатиту, токсоплазмозу або ВІЛ, беруть кров з вени. Кров, забрана з пальця, часто дає помилково негативні результати. Мононуклеоз діагностують після збору матеріалу мул зіву. Туберкульоз можна виявити після збору мокротиння, яка рясно виділяється у хворих в ранкові години.

Мазок з піхви і шийки матки на ПЛР простий аналіз, лякатися якого не варто. За 2-3 дні до його проведення потрібно відмовитися від статевого життя. Протягом цього ж часу забороняється використовувати для особистої гігієни гелі та мило на лужної основі. Підмиватися можна звичайною теплою водою з-під крана. Останнє підмивання ввечері перед ранковим відвідуванням лабораторії або лікарського кабінету.

Лікування молочниці за допомогою кремів, мазей, свічок або спреїв, якщо воно проводиться, теж бажано припинити. Мазок здається в перші кілька діб після менструації або відразу після неї. Для отримання більш точних результатів рекомендується не відвідувати туалет 2-3 години перед забором мазка ПЛР.

У чоловіків на ланцюгову реакцію беруть мазок з уретри. Біологічний матеріал забирають за допомогою стерильного зонда або ватного тампона, що вводиться в сечовипускальний канал. Під час процедури може з'явитися невеликий дискомфорт або відчуття печіння. Чоловікам теж доведеться тимчасово відмовитися від сексу і засобів гігієни. За тиждень до аналізу припиняється лікування антибіотиками і іншими препаратами. Якщо дискомфорт після забору зберігається, рекомендується швидше звернутися в поліклініку.

Припустимо, в дослідженні використовується кров або мазок, взятий з статевих органів пацієнта. Генетичний матеріал міститься в прилад-ампліфікатор для ПЛР, туди ж додаються ферменти. ДНК нагрівається до 90-95 ° С до руйнування ланцюжка на кілька ланок. Цей процес називається денатурацією. Під час роботи реактора з одного зразка ДНК і РНК створюються тисячі придатних для аналізу (розшифровка реакції) результату його копій.

Результати діагностики ПЛР

Ланцюгова реакція показує не тільки наявність інфекції, але і точну кількість наявних збудників. Розробка останніх років штучне введення мутаційних генів в ДНК людини з метою виявлення схильності до зміни генотипу.

Що виявляє діагностика інфекцій ПЛР?

Розшифровка результатів аналізу зазвичай проглядається окремо лікарем. Можливості ланцюгової реакції дозволяють підтвердити або спростувати наявність наступних хвороб:

1. Туберкульоз.
2. Гелікобактерна інфекція, часто що стає причиною болів в шлунку без видимих ​​на те причин.
3. Кандидоз ротової порожнини, піхви, дихальних шляхів і сечовипускального каналу.
4. Лістеріоз ( загибель захисних клітин імунної системи і руйнування нервової системи).
5. Кліщовий бореліоз (викликається патогенними бактеріями, також іменується хворобою Лайма). З'ясувати наявність хвороби Лайма можна тільки завдяки ПЛР.
6. Кліщовий енцефаліт (вірусне ураження центральної нервової системи).
7. Папилломавирусная інфекція поширений вид урологічної інфекції, легко передається за допомогою незахищеного статевого акту. Виражається найчастіше у вигляді гострих кондилом або бородавок на статевих органах. Небезпечний тим, що може вражати стравохід, пряму кишку і інші органи. Розшифровка результатів ПЛР дає можливість виявити вірус на зародковій стадії, не супроводжується жодними зовнішніми симптомами.
8. Уреаплазмоз хвороба, провоцируемая мікроорганізмами Ureaplasma urealyticum. Протягом багатьох років вона здатна жити в людському тілі, жодним чином себе не проявляючи. Дається взнаки при порушенні звичної мікрофлори.
9. Гарднереллез. У нормі бактерії-гарднерели живуть в жіночому організмі, не будучи причиною проблем зі здоров'ям. Прийом антибіотиків, часта зміна статевих партнерів, стреси порушують баланс піхви. З'являється дисбактеріоз, іменований гарднереллезом.
10. Хламідіоз безумовний чемпіон серед ЗПСШ. Викликається вірусними бактеріями-хламідіями. Щорічно їм заражається близько 100 млн чоловік.
11. Микоплазмоз. Гостре захворювання, що передається виключно при сексі двох різностатевих партнерів. Найчастіше до ПЛР-дослідження ховається під виглядом сальпингита або ендометриту.
12. Трихомоніаз суперник хламідіозу по «популярності». Піддається лікуванню, при відмові від нього інфекція призводить до безпліддя, патологій при вагітності, простатиту і циститу.
13. Герпетические захворювання. Навряд чи хворий їй людина згадує про те, що це за підступний ворог, коли страждає від ангіни або кон'юнктивіту. Різні типи герпесу вражають горло, статеві органи, слизові оболонки ока і шкірні покриви. Він маскується під гнійну ангіну, коросту, то під рясну сльозотечу, поки не буде проведено дослідження.
14. Цитомегаловирус. Бактерії, одного разу опинившись в організмі, ніколи не зникнуть. Вони проникають в кров хворих на СНІД, які перенесли операцію з трансплантації того чи іншого органу, що приймають препарати для придушення імунітету. Симптоми: тривала лихоманка з високою температурою, шкірний висип, біль у м'язах. Всі вони є показанням до проведення ПЛР.
15. Інфекційний мононуклеоз вірусна хвороба Філатова, що виявляється в висипаннях, жовчності склер і шкірних покривів, білому нальоті на мові.
16. Вірусні гепатити А, В, С, G. Гепатити легко переносяться і важко діагностуються, якщо не застосовувати методику даного аналізу. Розшифровка ПЛР результатів допомагає виявити проблему назовні, при цьому зараженому може здаватися, що у нього звичайний грип, головні болі, нудота, проблеми з печінкою або селезінкою;
17. ВІЛ-інфекція важке невиліковне порушення імунітету, яке до відкриття методу ПЛР неймовірно важко розпізнавалося. «Чума XX століття» стрімко прогресує, якщо її вчасно не виявити і не почати терапію підтримують препаратами.

Як зрозуміло з цього списку, ПЛР діагностика дарує лікарям багатьох вузько спеціальностей необмежені можливості. Застосовувати метод можна в пульмонології, вірусології, інфекціологіі, онкології, гастроентерології, гематології, гінекології та урології.

ПЛР розшифровка: результати

Аналізи ланцюгової реакції оцінюються тільки лікарями індивідуально для кожного пацієнта з урахуванням наявних патологій і хронічних хвороб. Результати аналізів ПЛР вказують, як уже сказано вище, на кількісні характеристики патогенних бактерій. Звіряючись з ними, лікар встановить ступінь тяжкості і стадію захворювання. Виходячи з цих показників, в подальшому призначається дозування препаратів і тривалість курсу прийому.

Негативний результат ПЛР означає, що в забраної біологічному матеріалі відсутні прояви будь-яких вірусів та інфекцій. Позитивний ПЛР сигнал до тривоги. Значить, в крові та інших біологічних рідинах пацієнта виявлена ​​інфекція.

Якщо значення мінімальні, це може свідчити про простому носійстві хвороби, а не тільки про активний розвиток захворювання. Простий переносник інфекції, виявлений тільки при ПЛР, але не виявляв жодних інших симптомів, повинен постійно спостерігатися у лікаря.

Важливо не піддаватися паніці і пам'ятати про те, що велика частина відомих науці вірусів піддається лікуванню антибактеріальними препаратами. Підбирати їх і замінювати один іншим при неефективності може тільки кваліфікований фахівець, який має досвід в лікуванні тієї чи іншої хвороби.

Розшифровка ПЛР може бути проведена не тільки на вимогу лікаря, але і за власним волевиявленням. Часто його роблять жінки, які планують найближчим часом вагітність, щоб переконатися у відсутності венеричних захворювань. При постановці на облік в районній консультації у вагітної все одно виникне необхідність в проходженні цього типу діагностики.

Призначають ПЛР в обов'язковому порядку жінкам, що мали кілька абортів або викиднів з різних причин. Перед ЕКО проводять аналіз для усунення всіх причин можливого відторгнення плодового яйця.

Чоловіки схильні проводити ПЛР після відпустки, під час якого мав місце курортний роман або навіть кілька. Діагностика допомагає їм не ставити під загрозу своє життя і здоров'я потенційних сексуальних партнерок.

Часто ПЛР стає єдиним шансом для пацієнта позбутися від хвороби на початковому етапі, коли нікчемний ризик ускладнень і тяжкого перебігу .